您现在的位置: 首 页 >> 农业论文 >> 入侵植物春飞蓬的生物检定与化学成分讨论

入侵植物春飞蓬的生物检定与化学成分讨论

作者:教学论文
出处:www.lunrr.com
时间:2019-10-18

费城埃里蒙(Erigeron philadelphicus L.)是埃里费隆(Erigeron)属的菊科植物,也称为费城(Philadelphia),它与埃里费隆(L.)Pers属的植物形式非常相似。它出现在中国的浙江,福建,上海,江苏,安徽等省市。它是起源于北美的外来入侵植物。 2015年,山东也有春蝇,我们进行了初步研究。

1实验材料,仪器和试剂

1. 1实验材料

使用的实验样品于2015年5月从山东省济南市采集,并由山东中医药大学徐灵川教授鉴定为费城的地上部分。从一年中收集花粉粒的对照样品。大肠杆菌(E. annuus(L.)Pers)的花序。也被确定;通过40目筛子筛分春季茎的干燥空中部分。

1. 2种乐器

SUPRATM55热场扫描电子显微镜(Zhesi Zeiss); DK-8D型电动恒温水箱(上海森新实验仪器有限公司); DYY-8型恒流电泳仪(上海奇特分析仪器有限公司); YXJ -2离心机(仙义离心仪器有限公司); PCR反应放大器(加拿大BBI); H6-1微电泳池(上海精益有机玻璃仪器厂);凝胶成像系统(Gene Genius)U-3010紫外可见分光光度计(Hitachi); Blospin植物基因组DNA提取试剂盒;移液器范围(100至1000 mL,20至200 mL,0.5至10 mL)(Semerfly Shier Technology Co.Ltd . UV-5800(Shanghai Yuan Analysis Co.Ltd.); Waters e2695高效液相色谱仪(美国沃特世公司)。

1. 3种试剂

芦丁标准物质(批号: YM0313SA14);黄cut苷(野生苷)参考物质(批号: ZM0520XA14)。亚硝酸钠,硝酸铝,氢氧化钠和乙醇均为分析纯。

2实验方法与结果

2。1春冠层的原始标识是一年生或过龄草本植物。茎直立,30-100厘米高,粗壮,上部有分枝,植株浓密分布长鬃毛和短鬃毛(多毛,明显),叶互生,基生叶莲座状,卵形或卵形叶披针形,两面具皱纹短柔毛,叶片安全地安全地安全地安全地安全地安全地安全地安全地安全地安全地安全地安全地安全地安全地安全地它有稀疏的牙齿并且被刚毛。数个花头,直径6-8毫米,萼片3片,草状,披针形,长3-5毫米,浅绿色,边缘半透明,中脉棕色,背面后脱落;2层结扎雌性,舌线形,长约6毫米,扁平,芽下垂,花期仍斜。舌状白色具粉红色,管状花两性,黄色,花期3-5个月。皮肤细胞和气孔2花粉粒3导管4纤维5冠毛6花药碎片7非腺毛8干实质细胞(细胞壁蔷薇加厚)图1春茎粉

2。2显微鉴定

2。2。粉末的显微镜观察为黄绿色。水合氯醛经加热渗透,可见三孔槽、近圆形的花粉粒,表面呈齿状突起,直径约18-20μm,非腺毛基部由2-3个细胞并列。顶端细胞尖呈刺刀状。气孔是椭圆形的,不确定。纤维呈束状,壁厚。大多数导管是螺纹导管。干细胞的实质细胞有珠状增厚。

2. 2. 2花粉粒的观察将春蝇的花粉和一年生的花冠放在标本上,并在喷金后观察二者的花粉粒。扫描电子显微镜照片显示,春花粉花粉的齿状装饰稀疏,刺的尖端很锋利,直径约为18μm(图2a)。年生冠层的齿状膨大相对较大,花粉粒的直径较大,约为22μm,齿状膨大的基部增大,齿状尖端的尖端较尖。

2. 3分子鉴定

2. 3. 1方法用Blospin植物基因组DNA提取试剂盒提取两株植物的总DNA,并使用一对通用引物ITS1-ITS4(ITS1: TCCGTAGGTGAACCTGCGG; ITS4: TCCTCCGCTTATTGATATGC)进行PCR扩增。上海生物生物工程有限公司合成。 PCR扩增反应系统: 2×Taq预混液25μL,DNA模板4μL,ITS1引物2μL,ITS4引物2μL,ddH2O 17μL。将反应系统中的所有组分精确转移到PCR试管中,并充分混合并放入PCR机中。扩增步骤:在94°C下预变性3分钟,然后进行35个循环(在94°C变性30 s,在50°C退火30 s,在72°C延伸1分钟),最后在72°C延伸°C 10分钟,产品在-4°C的冰箱中存储。 PCR产物检测: PCR产物5μL用3μLEB染色,并通过凝胶电泳以0.8%琼脂糖凝胶电泳的浓度进行检测。 PCR产物测序:将PCR扩增产物送到上海圣工生物工程有限公司进行测序。

2. 3. 2实验结果将本实验获得的ITS序列输入NCBI的GenBank中的Blast中,并进行同源性分析。结果表明:1号与彭春飞的同源性为99%。我们可以将其识别为春天的雨篷。 2号和每年穿刺的同源性率为99%,可以判断该植物为树冠。因此,可以从分子方面区分两者。

2. 4总黄酮含量的测定

2. 4. 1参比溶液的制备准确称取芦丁参比物质10的恒重。0 mg,置于100 mL容量瓶中,加70%乙醇,即参比溶液。

2. 4. 2制备测试溶液取弹簧蓬松粉约2. 5 g,精密称重后,加入14倍70%乙醇,加热回流3倍(1 h,1 h,1 h),3第二次回流,合并滤液,并在水浴上将溶剂蒸发至干,最后用70%乙醇制成500mL容量瓶。

2. 4. 3标准曲线的绘制在10 mL容量瓶中准确测量1、2、3、4和5 mL芦丁参比溶液,加入2 mL 70%乙醇,准确加入5%亚硝酸钠。溶液0. 3 mL,摇匀,放置6 min,精确添加10%硝酸铝溶液0.3 mL,混合,放置6 min,精确添加2 mL氢氧化钠测试溶液,摇匀,放置10 min,使用将70%乙醇稀释至刻度。使用紫外可见分光光度法在510 nm处测量吸光度,并将相应的试剂作为空白。芦丁标准物质的浓度绘制在纵坐标(Y)上,溶液的吸光度绘制在横坐标(X)上。回归方程为Y=0。 068 4X +0。002 8,R=0。 999 9,结果表明芦丁标准物质的浓度在5至50μgmL范围内与溶液的吸光度具有良好的线性关系。

2. 4. 4计算总黄酮含量根据紫外可见分光光度法,在510 nm下测量吸光度值,并从标准曲线计算总黄酮含量。实验数据表明,春冠总黄酮含量约为0.59%。

2. 5 cut子苷含量的测定参考物质和测试溶液是根据2010版药典方法制备的。根据2010年版的《中国药典》中的黄cut苷含量测定方法,未检出黄cut苷。

3讨论

春蝇原产于北美,是近年来在中国南部发现的外来入侵植物,但最早在山东报道。因为它的植物形式与当年非常相似,所以经常将其误认为一年。可以仔细地区分其形态特征,例如叶的顶点形状,花的开放特性,开花期和毛茸茸。此外,可以通过分子鉴定方法进一步区分。通过对春季冠层的初步鉴定研究,该粉末的主要微观特征是花粉粒,多细胞非腺毛,带螺纹的导管,表皮细胞和无定形气孔,纤维,冠毛,花药碎片和干实质细胞。等等。从花粉粒的扫描电子显微镜照片中可以看出,春季牡丹的花颗粒小于年花粉颗粒的直径,外壁的齿状脊更稀疏而钝。得到弹簧柄的ITS序列。春冠全株总黄酮含量为0. 59%;分光光度法未检测到盾cut素。数据报道,世界上有200多种Heliconia属,其中30多种已被研究。在中国,只有灯盏花属(Erigeron breviscapus(Vant。)Hand)。忍冬。对其他植物的研究较少,也没有深入研究。通常,大多数属植物都含有诸如类黄酮,固醇,萜烯,挥发油和咖啡螨的化合物。实验表明,春亚麻中含有类黄酮,有合理的推测其具有一定的资源利用价值,有必要对其系统的化学组成和药理作用进行研究。

最新论文
关于农田水利渠道的设计及施工探讨
关于FSC赛车翼型的选择与二维流场分析
一人公司的单位犯罪主体的适格性探析
临床护理路径在精神分裂症患者中的实践
债权人向休眠公司追偿债务的诉讼问题
关于《少年pi的奇幻漂流》的思考
关于庞德法律社会控制思想论述
关于《少年pi的奇幻漂流》的思考
关于国际贸易融资存在的风险及其对策的分析
入侵植物春飞蓬的生物检定与化学成分讨论
关于FSC赛车翼型的选择与二维流场分析
债权人向休眠公司追偿债务的诉讼问题
热门论文
互联网+环境下多媒体教学方法体系分析
低年级写字教学的有效途径的研究
关于《少年pi的奇幻漂流》的思考
关于中职学生心理健康问题及教育措施探讨
关于国际税收协定的相关问题的探讨
进行小学五年级语文阅读教学的策略探究
关于《大灭绝时代》的感想及延伸
教育学论文发表(期刊和注意事项)
如何提高单招三年级语文教学复习绩效
《虢国夫人游春图》主体人物辨析
儿童画意钢琴曲《圆》的整体特征分析
加强对农村小学教学的管理措施探讨
关于微生态滤床在雨水利用暨景观水处理中的应用研究
热门标签
日期归档
2019年10月
2019年09月